肠道类器官是一种高度模拟真实肠道结构和功能的体外模型，已成为研究肠道生理、病理及疾病机制的重要工具。其培养过程需要精准控制培养条件及细胞因子的添加，不同阶段所需的细胞因子也会有所不同。

一、初始培养阶段

在初始培养阶段（干细胞增殖），使用的培养基为基础培养基（如DMEM/F-12）。相关生长因子包括：

• Wnt-3a：激活Wnt信号通路，维持干细胞的自我更新。
• R-spondin-1：增强Wnt信号，促进干细胞增殖。
• EGF（表皮生长因子）：促进细胞增殖。

同时，抑制因子如Noggin可以抑制BMP信号，保持干细胞的未分化状态。

二、分化诱导阶段

在分化诱导阶段，继续使用DMEM/F-12等基础培养基，并在此阶段引入以下因子：

• Activin A和FGF2：在分化初期加入以促进内胚层的形成。
• IL-22：在分化中期加入，促进潘氏细胞的分化。
• CHIR99021：作为GSK3β抑制剂，用于调控Wnt信号通路，促进细胞分化。

在此阶段，也需适当去除或减少某些增殖因子，例如降低EGF浓度，以避免对细胞增殖的过度刺激。

三、维持与长期培养阶段

类器官经过分化后，进入维持与长期培养阶段，此时培养基的调整主要目的是维持类器官的稳定性和功能：

• 基础培养基：继续使用适合的培养基。
• 维持因子：根据需要调整Wnt信号通路的激活或抑制，如调整Wnt-3a和Noggin的浓度。
• 去除分化诱导因子：逐渐减少或去除Activin A、FGF2等因素。

四、注意事项

在培养过程中，需要注意以下事项：

• 培养基的更换频率：通常每2-3天更换一次，以确保营养成分的充足及代谢废物的清除。
• 监测类器官状态：定期观察其形态和生长状态，及时调整培养条件。
• 无菌操作：严格遵守无菌操作规范，以避免污染。

通过以上阶段性的培养基调整，可以有效诱导小鼠肠道类器官的成功分化，并维持其长期稳定的培养。金年会金字招牌诚信至上，不仅提供所需的基础培养基和细胞因子，还推出了现成的小鼠肠道类器官培养基套装3DCultrIntestinalOrganoidGrowthMedium(Mouse)，使用便捷，操作简单，为您的科研提供更好的支持与保障。