在实验室进行细胞培养时，您是否遇到过细胞状态不佳的问题？胎牛血清（FBS）是细胞培养不可或缺的重要组分，对细胞的生长至关重要。因此，我们为您总结了一些使用建议和注意事项，供您参考，记得收藏哦。

胎牛血清的保存方法

胎牛血清通常储存于-20℃，若需长期保存则建议在-80℃下保存，并尽量避免反复冻融。若需要多次使用，建议提前分装，每次按需解冻，以减少损耗。或者，您可以选择小规格50mL的产品，方便快捷。

胎牛血清的解冻方法

解冻时最推荐的方法是将胎牛血清从低温环境取出后，放入2-8℃的冰箱中慢慢解冻（可过夜），待其部分融解后再在室温下完全解冻。在解冻过程中，定期轻轻摇动瓶身以混合液体，能有效降低沉淀的产生。避免直接在25-37℃环境中快速解冻，以避免沉淀形成并影响血清成分的活性，进而影响细胞的培养状态与生长速率。

解冻后沉淀物质的分析

血清解冻后可能出现的沉淀，包括纤维蛋白、脂蛋白、冷凝集素等，可以影响细胞对营养物质的吸收。沉淀物质如纤维蛋白通常为肉眼可见，可能会在细胞培养中产生不良影响。可以使用离心的方法去除沉淀，而不建议过滤，以避免营养成分的流失。

胎牛血清使用中的过滤必要性

血清在出厂前已经过严格的无菌处理，因此在细菌层面上不需要额外过滤，除非有沉淀物。可以通过离心去除沉淀，再加入培养基时进行过滤，以尽量减少对营养物质的损失。

细胞消化的最佳时机与方法

待细胞生长至80%密度时进行消化，避免过密。用PBS清洗细胞后，使用预热过的胰酶（一般0.25%浓度）进行消化。细胞消化的时间通常为2-5分钟，可通过显微镜观察细胞状态来判断是否终止消化。

更换胎牛血清品牌的操作指南

在细胞培养中，常规使用胎牛血清的添加比例为10%。若更换品牌，应逐步替换，以帮助细胞适应新环境。建议首先使用原品牌的血清复苏细胞，并在细胞稳定后，逐步增加新血清的比例到100%。

显微镜下“小黑点”的原因及处理

在细胞培养中出现的“小黑点”可能是细菌、真菌、细胞碎片或血清沉淀物引起的。为了判断和处理这些点，可以通过显微镜观察其运动性和形态。若确认存在微生物污染，应丢弃受污染的细胞。

胎牛血清的灭活需求

对于大多数细胞培养，通常不需要灭活胎牛血清。但在特定实验中，如免疫研究或胚胎干细胞培养时，推荐使用灭活血清。灭活时应注意加热温度及时间，以避免损坏血清的质量。

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